Трихомониаз.ру


» » Мочеполовой трихомониаз (клинико-лабораторное обследование и ведение пациентов)

Мочеполовой трихомониаз (клинико-лабораторное обследование и ведение пациентов)

МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ (ПЦР - АНАЛИЗ, ДНК-ГИБРИДИЗАЦИЯ)


Использование полимеразной цепной реакции в диагностике мочеполового трихомониаза в настоящее время ограничивается рамками вспомогательного метода (Дмитриев Г.А. и др., 2003). ПЦР может служить альтернативой регламентируемого комплекса лабораторных исследований при мочеполовом трихомониазе. Метод нашел свое применение в различных областях медицины и биологии как высокоточный и позволяющий определить наличие инфекционного агента, однако, при мочеполовом трихомониазе как, впрочем, и при ряде других ИППП, ПЦР не является регламентированным и применяется редко. В то же время, существует и другое мнение. Так, Е.Г. Бочкарев с соавторами (2001), включает ПЦР в четверку основных лабораторных методов диагностики при мочеполовом трихомониазе наряду с микроскопическим, культуральным и иммунологическим. По мнению авторов, ПЦР наряду с культуральным методом занимает первое место в клинической лабораторной диагностике трихомониаза. В качестве основных преимуществ метода приводится: быстрое получение результатов и возможность одновременного выявления в биопробе нескольких возбудителей, идентификации единичных микроорганизмов в связи с высокой чувствительностью и специфичностью метода, прямое определение возбудителя. По данным зарубежных авторов, чувствительность ПЦР составляет 97%, а специфичность 98%, по сравнению с 70% и 36%, соответственно, при культуральном и микроскопическом методах исследования (Do Nascimento M.C. et al., 1998; Nath К. Et al., 2000). ПЦР исследование рекомендуется проводить при необходимости выявления Т. vaginalis на фоне микст — инфекции урогенитального тракта, для контроля эффективности антибактериального лечения, проведения скрининговых исследований в комплексе с микроскопическим методом и для его дополнительного контроля.

Тест-системы для выявления ДНК Trichomonas vaginalis «Диаген- Trichomonas» (ЗАО «ЛАГИС»), АмплиСенс Trichomonas vaginalis - 250 (НИИЭ МЗ РФ) и другие основаны на методе полимеразной цепной реакции и предназначены для быстрого обнаружения ДНК Trichomonas vaginalis в биологических пробах и идентификации культур до вида. Тест-системы представляют собой набор из трех комплектов реагентов: комплекта для выявления ДНК Trichomonas vaginalis в клиническом материале; комплекта для амплификации ДНК Trichomonas vaginalis; комплекта для детекции продуктов амплификации. Одна тест-система рассчитана на постановку 100 определений, включая контрольные. Срок годности составляет 6 месяцев.

Чувствительность ПЦР при использовании нами первой из перечисленных тест-систем составила 87,1% по отношению к результатам бактериологического метода, специфичность - 89,2%, воспроизводимость, определенная путем 8-кратного повторного исследования различных концентраций 106-102 штамма Trichomonas vaginalis — 100% при концентрации 104 клеток в 1 мл. По данным ряда исследователей, использование другой тест системы позволило продемонстрировать более высокую эффективность этой методологии при детекции Т.vaginalis. Тест-система «АмплиСенс Trichomonas vaginalis - 250» позволяет выявлять в 100% постановок ДНК Т. vaginalis в концентрациях 5х10з эквивалентов геномов в 1 мл. Показатель чувствительности представленной тест-системы составил около 93%, специфичности - 91,7%.

Еще одной весьма перспективной методикой диагностики трихомониаза, на наш взгляд, является ДНК-гибридизация. Метод разработан известной фирмой Becton-Dickinson (США). Наш небольшой опыт работы с оборудованием и тест-системами для ДНК-диагностики (Affirm) трихомониаза позволяет с оптимизмом относится к этому направлению научно-практических исследований. Сопоставительный анализ продемонстрировал высокую эффективность методологии, простоту и удобство в применении, возможность выявлять в одной пробе одновременно Т. vaginalis, spp. Candida, G. vaginalis, что очень важно при наличии сочетанных (смешанных) инфекций урогенитального тракта. Эта методология официально зарегистрирована в России и рекомендована СДС (США) для диагностики бактериального вагиноза (Sexually Transmitted Diseases, 2002), который, как известно, является мульти-факторным состоянием и сопровождается вовлечением в процесс ряда патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Единственным ограничением для ее широкого использования является высокая стоимость оборудования и наборов, а также недостаточная информированность о нем. По данным Дмитриева Г.А. с соавт. (2003) совпадение результатов ДНК гибридизации с данными бактериоскопии при урогенитальном трихомониазе наблюдается в 87,5% случаев, при этом в 62,5 % наблюдений Affirm VP III был положительным и для Gardnerella vaginalis, хотя «ключевые» клетки при бактериоскопии обнаружены не были. В 12,5% наблюдений Trichomonas vaginalis выявлены в уретре при бактериоскопии, однако Affirm VP III система дала отрицательный результат (таблица 4).

Таблица 4. Сравнительные результаты идентификации Trichomonas vaginalis методом бактериоскопии и с помощью Affirm VP III

'Мочеполовой


Страницы: 1 ... 12 13 14 15 16 17 18 19 20 ... 26


Категории: Специалистам / Публикации / Пособие для врачей